石家庄天泉良种奶牛有限公司活体采卵体外受精常规实验室及超净工作间于2018年9月底建设安装完毕，主要仪器设备同时就位。随着硬件设施的完善，奶牛活体采卵体外受精技术研发推广工作也将步入常态化轨道。但是，牛活体采卵体外受精技术是一项流程极为繁复精细的高新生物技术，对环境、设备、培养系统、人员操作的要求非常高，要建立高效、稳定的工艺流程并非易事。

2018年12月7日-17日，繁殖与智慧牛场岗位依托单位石家庄天泉良种奶牛有限公司技术人员怀着紧张而忐忑的心情，首次开展牛活体采卵体外受精（OPU-IVF）系统的实操调试。

本次首次调试工作由岗位专家余文莉博士全程指导，并邀请到美国MOFA科技部（亚洲市场部）主任吴卫东博士协助；吴卫东博士多年致力于家畜繁殖技术服务，在活体采卵、体外受精方面有丰富的实践经验，此次也是特地抽出两天的时间来给我们技术人员现场把关。

整个调试工作模拟活体采卵体外受精技术的全流程，从实验室的消毒、器皿灭菌、液体准备到活体及离体卵子的采集、成熟、受精、发育培养，均严格按照正规实验一丝不苟地进行。在此之前，本岗位与北京畜牧兽医研究所朱化彬团队对接，对技术人员朱宏波、张普进行了系统培训，全体技术人员学习了吴卫东博士带来的视频培训资料。朱宏波、张普在此次调试的室内操作中发挥了重要作用。

本次共完成以下项目的调试：

1、    新购置的活体采卵泵、阴道穿刺探头及B超影像装置的调试，并采到合格的卵丘卵子复合体；

2、    共从5对离体卵巢采集160余枚卵子，采到合格的卵丘卵子复合体120枚，并今天体外成熟培养；

3、    用梯度离心法对冷冻精液处理，调试浓度，对体外成熟培养的卵子进行体外受精培养20小时；

4、    对体外受精培养后的卵子（合子）进行体外发育培养48小时，获得64.5%的卵裂率；

5、    换液后继续进行5天培养。但是，在最后一天牛场停电，培养箱温度降低到35°C，影响到胚胎后期发育，仅获得约20%的囊胚率。

尽管此次调试工作因最后阶段停电导致较低的囊胚率，但整体试验达到了预期目的，说明我们的培养体系能够正常运转。同时，也暴露了一些问题，如实验室电路连接问题，使得停电后不能马上启动；实验室的设备、设施摆放不尽合理，使得操作时不方便，浪费时间；还需添置一些细小的实验用品，使实验更流畅；实验室超净设备的使用应加以规范；人员之间的相互配合还需要不断加强等。针对上述问题我们正在紧锣密鼓地调整完善，准备不久再进行第二次试验。

岗位专家余文莉博士表示，实验人员以后每月至少保证两次OPU-IVF实验，要制定并严格遵守IVF实验室卫生管理制度。相信随着实验的不断完善和深入，OPU-IVF工作将很快步入正轨！