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牛羊胚胎移植措施

 羊胚胎移植是将良种母羊的早期胚胎取出,移植到同种的生理状态相同的母羊体内,使之继续发育成为新的个体。羊胚胎移植可极大地提高优秀种母羊的利用率,减少引种的外汇支出,同时可使种羊实现批量生产,便于饲养管理,提高成活率,降低生产成本。胚胎移植是系统复杂的生物工程,任何一个环节都直接影响胚胎移植效果。羊只进行胚胎移植的生理基础是母羊发情后的生殖器官发育利于妊娠,无论配种与否,都为妊娠做好了准备。同时,早期胚胎处于游离状态,加之受体对胚胎没有排斥作用,可使移植的胚胎继续发育。进行胚胎移植时,要遵循严格的技术原则,按照操作程序规范来进行。

  胚胎移植原则

  供体受体生殖环境的一致性

  胚胎移植中必须要保证供体和受体环境相同或者相似,主要包括三个方面:第一,供体和受体属于同一物种。一般来说,在分类学上亲缘关系较远的物种,由于胚胎结构、发育条件、发育进程等存在差异较大,这样的两个物种进行胚胎移植,大多数情况不能存活,或者是能够存活很短时间。但是,可以利用这短暂的存活时间来临时保存一下胚胎,比如,可将猪、牛、羊的早期胚胎移植到兔输卵管内进行几天的临时保存。第二,供体受体生理同期化。这里所说的生理同期化是指供体受体羊的发情时间要保持一致,或者说两者之间相差不超过24小时,否则移植难以成功。第三,供体和受体羊只胚胎移植的部位要一致,也就是说前后移植要遵循同一性的原则。换句话说,就是从供体子宫内收集到的月胚胎必须移植到受体子宫内,从供体输卵管内收集到的胚胎必须移植到受体输卵管内。这主要是因为发育中的胚胎对环境非常敏感。子宫在卵巢类固醇激素作用下,处于时刻变化的动态之中。

  胚胎移植时间的适宜性

  胚胎移植时间的选择有着严格规定,一般要在黄体期早期以及胚胎移植之前进行,所以,对于胚胎的收集要严格控制在发情配种期后1周内的时间里,最好是在发情配种期后3天~4天进行收集。

  胚胎本身正常性

  在进行胚胎移植的时候,要对其进行仔细检查,只有确保其发育正常,才可以进行移植。此外,在胚胎收集保存过程中,要尽量让其免受物理、化学、生物等各方面影响,保证其完好性。

  操作要点

  选择适宜的时间

  要综合考虑供体受体发情情况以及子宫与胚胎发育情况,选择胚胎移植时间,只有这两方面达到一致化,才可进行胚胎移植。因为供体羊只所提供的是超排卵,这样单个卵细胞排出时间就存在较大的差异性。要综合考虑上述两方面因素。有经验者完全可以根据黄体的表征来鉴定子宫发育情况。移植前,检查受体羊只,详细了解黄体发育情况,进而判断是否可以进行胚胎移植。

  受体羊只术前处理

  胚胎移植之前,应该详细检查并确定受体羊只卵巢上的黄体是否发育良好。条件允许时,可组织受体羊进行腹腔镜检查,进一步确定黄体的数量、质量以及所处的位置,以保证移植开始后,不用再拉出卵巢进行检查。此外,为了保证手术顺利进行,在术前要让受体羊只饥饿20小时左右,并于手术前将其毛发剃光,为接下来的手术做准备。

  胚胎移植操作

  目前,常用的胚胎移植方法主要有子宫移植和输卵管移植两种,子宫移植应先将胚胎移植到子宫角前1/3处,输卵管移植应由伞部植入。在吸胚胎时,为了避免吸管在移动时丢失胚胎,可按照用吸管“吸入一段培养液、吸入一段小气泡、吸取胚胎、吸入一段小气泡、吸入一段培养液”的顺序进行。

  输卵管法移植前使伞部的输卵管处于较直的状态,以便于移卵者能见到牵出的输卵管部分处于输管系膜的正上面,并能见到喇叭口的一侧。此时,移卵者将移卵管前端插入输卵管,然后缓缓加大移卵管内的压力,把带有胚胎的保存液输入输卵管内。移卵后要保持输卵管内的指压,抽出移卵管。若在输卵管内放松指压,移卵管内的负压就会将输卵管内的胚胎再吸出来。输卵后还要再镜检移卵管,观察是否还有胚胎的存在,若没有,说明已移入。及时将器官复位,并做腹壁缝合。子宫移卵时,可以使用自制的移卵管。移卵时,将要移的胚胎吸入移卵管后,直接用钝性导管插入母羊的子宫角腔,当移卵管进入子宫腔内时,会有插空的手感。此时,稍向移卵管内加压,若移卵管已插入子官腔,移卵管内的液体会发生移动。若不能移动,需调整钝性导管或移卵管的方向或深浅度,再行加压,直至顺利挤入液体为止。

  注意事项

  在胚胎移植的前期和后期,无论是供体羊还是受体羊都要保持均衡的营养水平和良好的体况,蛋白质饲料、能量饲料、矿物质饲料、维生素等要合理搭配,不要随意提高或降低,防止饲喂腐败变质的饲草饲料。还要注意防疫灭病和驱虫。在胚胎移植进入日程后,不要随意使用药物(如抗菌药物、抗寄生虫类药物、疫苗等),避免一些药物对胚胎形成和发育造成影响。加强后期受体羊的饲养管理是提高受胎率的重要手段,特别是在舍饲的条件下,应满足各阶段营养,加强运动,严防挤压碰撞。

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